Расследуя новые преступления, Бэтмен обнаруживает, что это дело рук Джокера, которому удалось сбежать из лечебницы Аркхэма. Заклятый враг Бэтмена намерен доказать, что мир — это хаос, а безумными могут быть даже те, кого считают образцом выдержки и морали. В качестве своих главных жертв он выбирает комиссара Джеймса Гордона и его дочь Барбару — Бэтгерл. 

• После выхода игры “Бэтмен: Рыцарь Аркхема” актер Марк Хэмилл заявил, что он никогда больше не будет озвучивать Джокера из-за сильного напряжения, которое приходится испытывать его голосовым связкам, с оговоркой, что готов сделать исключение только для экранизации “Бэтмен: Убийственная шутка”. Актер сдержал слово и снова озвучил этого персонажа.
• Изначально этот фильм планировали выпустить сразу на видео, но поскольку уровень его ожидания сильно возрос после объявления об участии в проекте Кевина Конроя и Марка Хэмилла, он получил кинотеатральный релиз, став всего вторым анимационным проектом DC, попавшим в кинотеатры. Первым был “Бэтмен: Маска фантазма”.
• Дизайн бэтмобиля в этом фильме основан на его классическом дизайне из мультсериала “Бэтмен” 1992 года, над которым также работал продюсер Брюс Тимм.